Bonjour

Lors d'un TP, j'ai du calibrer un HPLC.
J'ai formé un mélange de benzène, naphtalène et fluorène que j'ai ensuite injecté dans la colonne.

Je bloque pour ma conclusion sur la répétabilité des injections.
J'ai un écart-type relatif de 0.469% pour les temps de rétention. Malheureusement, je n'ai pas trouvé quel était la valeur moyenne (ou maximal) qu'on devrait obtenir.
Sachant que j'avais un léger problème de stabilité de la pression, cet écart-type relatif est-il élevé ou non ?

Voici un petit tableau qui reprend mes temps de rétention :

Injections	Benzène	Naphtalène	Fluorène
1	1.285	2.300	4.583
2	1.273	2.273	4.540
3	1.282	2.267	4.532
4	1.282	2.267	4.532
5	1.275	2.263	4.525
Moyenne	1.279	2.274	4.542
écart-type	0.005	0.013	0.021
écart-type relatif	0.359	0.589	0.459

Merci

Cette écart me parait faible, tout dépends de la colonne, HPLC, concentration ... utilisé.
Donc:

• Est-ce que c'est des injections manuelles avec départ de la séquence manuelle (comme su le vielle HPLC)?
• Il manque comme donnée une idée de la largueur du pic (mi_hauteur, onset/offset...) pour voir si il y des problème de saturation, diffusion ...
• De manière général il faut mieux superposé les différents chromatogramme pour être sur de l'attribution
• Ou sort le "pic" de l'injection?

L'injection est manuelle. Je les ai faites via une micro-seringue en ajoutant le plus précisément possible 10 µl.

Pour la largeur du pic à mi hauteur, j'ai 1 mm. D’ailleurs, je pense que j'ai mis une vitesse de défilement du papier trop faible (10 mm/min)
Les pics ont l'air "normal". En plus de la largeur faible, les maximas ne dépasse pas les 3/4 de mon papier.

Que veut-tu dire par superposer les chromato ?

Citation

Ou sort le "pic" de l'injection?

Je ne comprend pas trop ta question.
Les pics sont imprimé via un intégrateur directement lié au détecteur.

Citation : okuni

Pour la largeur du pic à mi hauteur, j'ai 1 mm. D’ailleurs, je pense que j'ai mis une vitesse de défilement du papier trop faible (10 mm/min)

Donc une incertitude de 0.1 min, ce qui est inférieur à l'écart entre les différentes mesures.
Vu le type de HPLC que tu décrit il doit aussi avoir une bonne incertitude de 1 seconde sur l'injections.

Pour le "pic solvant" c'est ce que j’appelle une petit perturbation de la ligne de base du à l'injection. il te sert de référence interne.

J'aurai donc du avoir un écart max de 0.1% ?

Non, je me suis mal exprimer. Tout tes pic ont une largueur de l'ordre de 0.1 min (6 secondes). Théoriquement le pic devrait être beaucoup plus faible (surtout pour des temps d'analyse aussi faible), donc a mon avis tu as un problème de saturation.

Tres résultats sont très reproductible.

LE mieux comme je l'ai dit est de superposé tes chromatogrammes pour voir si les pic sont bien au même endroit.
En général ce qui est important dans une analyse de chromato c'est plutôt une bon séparation de tes espèces ce qui est le cas ici.

Ok merci
Qu'est-ce que j'aurai du faire ?
augmenter la vitesse du papier ? ou injecter moins ?

Tout d'abord avoir une chromato plus moderne pour pouvoir traiter informatiquement le signal (les superposer, zoomer...).
Sinon en général si le largueur du pic est élevé il faudrait injecté moins de produit.

haha, il faut dire ça à mes profs

Ok, merci pour ton aide

Ce n'est pas forcément a tes prof mes aussi au étudiant de faire des démarche. D'exprience cela marche meieux dans une demande de sous pour du matos de TP (par exemple au près de la région) si les étudiants s'implique.